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一种原代细胞专用慢病毒感染试剂盒及其使用方法与应用 CN202310023897.9 - 本发明公开一种原代细胞专用慢病毒感染试剂盒及其使用方法与应用，涉及慢病毒病毒感染原代细胞培养技术领域。本发明公开的原代细胞专用慢病毒感染试剂盒，包括A、B、C三种组分，所述A组分中含有95％DMEM/F12基础培养基和5％胎牛血清；所述B组分中含有250μg/ml支原体抑制剂和5000U/ml青‑链霉素；所述C组分中含有50～200mg/ml Pluronic F‑127。本发明提供的原代细胞专用慢病毒感染试剂盒，其在慢病毒感染原料细胞的过程中使用时，能够显著提高原代细胞感染效率，增加原代细胞感染的成功率，且不影响细胞状态和特性，使感染后的细胞状态更好，并降低了细胞受到污染的概率。 实质审查
将猴源NOVA1基因特异性地修改为人源基因的方法 CN202211334732.5 - 本发明属于基因工程和基因遗传修饰领域，提供了一种将猴源NOVA1基因修改为人源基因的方法，包括：确定猴源细胞NOVA1基因组修改为人源基因的特异性位点和所述sgRNA，所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1；合成含所述的sgRNA的U6‑sgRNA‑scafold的联合序列，扩增含嘌呤霉素的片段，并构建到原始载体pCMV‑T7‑ABEmax（7.10）‑SpRY‑P2A‑EGFP上，成为最终载体pCMV‑T7‑ABEmax（7.10）‑NOVA1。本发明实现了对NOVA1基因的定点突变，为针对NOVA1基因特定位点的研究提供了一种具有可能性的技术手段和临床思路。 实质审查
巨噬细胞诱导破骨细胞的方法、破骨细胞检测试剂盒及应用 CN202211039309.2 - 本发明公开一种巨噬细胞诱导破骨细胞的方法、破骨细胞检测试剂盒及应用，涉及医学与生物技术领域。本发明公开的巨噬细胞诱导破骨细胞的方法包括：采用LPS、M‑CSF、IL‑6、FBS、DMEM和双抗配制巨噬细胞培养基，细胞铺板，培养巨噬细胞；采用M‑CSF、RANKL和IL‑6配制破骨细胞培养基，细胞铺板，诱导活化为破骨细胞；将破骨细胞进行TRAP染色；采用流式检测多核细胞比例；还公开了用于巨噬细胞诱导破骨细胞的破骨细胞检测试剂盒。本发明提供的巨噬细胞诱导破骨细胞的方法，大大缩短了诱导周期，成本低，诱导成功率高。 实质审查
一种快速鉴定细胞种属的检测试剂盒 CN202210747145.2 - 本发明属于基因检测领域，涉及一种能够快速鉴定实验室常用细胞的种属是否为人源、小鼠源、大鼠源的试剂盒，可以用来判断细胞是否出现种属混杂的污染。本发明提供了鉴定种属的引物组合物、其应用以及一站式试剂盒，试剂盒同时附有3个种属的阴阳性样本，方便比对结果，检测速度快，引物的特异性好。使用该试剂盒可以完整的进行细胞种属鉴定实验，可以在5小时内，拿到种属鉴定结果，及时对实验进行调整。通常不需要额外操作步骤，并且快速得到种属鉴定结果。 实质审查
一种降低新冠病毒受体ACE2表达量的表观遗传载体 CN202210729135.6 - 本发明公开了一种可用于指示新冠病毒受体ACE2表达量的载体、细胞株及其制备方法与应用，通过表观遗传基因编辑载体CRISPRoff‑v2.1中的蓝色荧光蛋白TagBFP替换为绿色荧光蛋白EGFP的编码序列、导入抗生素筛选标记基因和荧光标记基因，同时加入能切割ACE2启动子基因组的sgRNA，获得表观遗传修饰载体，并最终得到能够降低ACE2表达量的细胞株。本发明构建的载体和细胞能特异性地降低新冠病毒受体ACE2的表达，为治疗新冠提供了另一种具有可能性的技术手段和临床思路。 实质审查
一种小鼠毛囊干细胞的分离培养方法 CN202210607223.9 - 本发明涉及一种毛囊干细胞分离培养技术，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：S1，分离小鼠毛囊组织；所述小鼠为出生24小时内的小鼠；S2，酶解消化组织；S3，差速贴壁筛选毛囊干细胞；S4，小鼠毛囊干细胞的培养和传代。该方法综合了显微分离技术、酶解法、差速贴壁筛选法，比传统的毛囊干细胞分离方法更适用于小鼠毛囊组织的分离提取，来获取纯度更高、活性更好，干性更强的小鼠毛囊干细胞。 实质审查
一种慢病毒的纯化方法 CN202111136995.0 2024-11-05 本发明涉及一种慢病毒的纯化方法，该纯化方法是在纯化的浓缩过程中使用一定浓度的PEG（添加KCl或NaCl）按比例与病毒上清进行混合，离心，得到慢病毒沉淀；用PBS溶解，对获得的慢病毒悬液进行核酸酶Benzonase酶切处理；添加鱼精蛋白进行沉淀慢病毒，添加1mol/L NaCl溶解病毒，离心，得到初纯化的慢病毒悬液；再经过蔗糖密度梯度离心，获得纯化的慢病毒。本发明制得的慢病毒纯化液无外源因子污染，细胞宿主蛋白、宿主DNA残留度低，安全性好，纯度和滴度高，可达到动物实验及临床要求。 专利权的授权
一种结直肠癌顺铂耐药株的构建方法 CN202110985456.8 2023-07-14 本发明涉及一种结直肠癌顺铂耐药株的构建方法，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种新型的耐药株构建方法，将磁珠分选法与常规的耐药株筛选法结合，选用P‑糖蛋白（P‑gp）作为耐药靶点，用其编码基因ABCB1的抗体标记细胞，通过磁珠分选将具备耐药性的细胞群从亲本株中分离出来。该方法构建周期短、成功率高、构建菌株耐药性稳定。 专利权的授权
一种针对悬浮细胞的慢病毒载体及其应用 CN202110737586.X 2023-05-12 本发明公开了一种针对悬浮细胞的慢病毒载体及其应用，属于生物技术领域。本发明中的慢病毒载体是以pLVX‑EGFP‑IRES‑Puro为框架，插入了Ubi启动子和Cbh启动子。该慢病毒载体普遍适用于悬浮细胞的表达，表达效率高效、稳定，能够极大程度地提升悬浮细胞中的过表达效果，且表达过程简单易行，易于推广。 专利权的授权
一种SD大鼠心肌缺血模型的构建方法 CN202110671941.8 2023-07-07 本发明公开一种SD大鼠心肌缺血模型的构建方法，涉及医学试验技术领域。本发明公开的SD大鼠心肌缺血模型的构建方法为：麻醉大鼠；剪开大鼠颈部皮肤、分离颈部肌肉至暴露气管，将气管插管针插入大鼠气管与呼吸机相连；大鼠左侧胸部去毛、备皮，分离胸浅肌和深肌，在第三和第四肋骨间切口，将缝合线预埋在第三、第四肋骨间的肌肉中，使用缝合线结扎心脏左前降支；用缝合线对大鼠胸腔进行缝合，使用连接有软质硅胶导管的注射器对大鼠胸腔进行排气；拔出气管插管针，逐层缝合即可。本发明提供的SD大鼠心肌缺血模型的构建方法，提高了大鼠心肌缺血模型构建的成功率，降低了模型构建的操作难度，缩短了模型构建的操作时间。 专利权的授权